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HA多肽是一种常用于通过竞争性结合Anti-HA抗体，从而在免疫沉淀时洗脱与Anti-HA抗体结合的HA融合表达蛋白的多肽。本产品不仅可以用于Anti-HA Magnetic Beads（货号：YTB4317）免疫沉淀时HA融合表达蛋白的洗脱，也可以用于常规的Anti-HA抗体免疫沉淀时HA融合表达蛋白的洗脱。

本产品竞争性洗脱HA融合表达蛋白后，洗脱后的样品中不含Anti-HA抗体的轻链和重链，可以有效解决免疫沉淀后Western检测时轻链和重链的干扰问题。普通的免疫沉淀，通常是通过加入上样缓冲液煮沸从而使HA融合表达蛋白进入到溶液中，但此时Anti-HA抗体的轻链和重链也会进入到溶液中，并很可能会干扰后续的Western检测。

本产品溶液包装产品浓度为5mg/ml，配制在TBS中，可以直接使用。25mg为粉末装。HA Peptide (HA多肽)常用储存液浓度为5～25mg/ml，常用使用浓度为100～400μg/ml。


CAS：92000-76-5
分子式：C₅₃H₆₇N₉O₁₇
分子量：~1102
纯度：~98% by HPLC
序列：Tyr-Pro-Tyr-Asp-Val-Pro-Asp-Tyr-Ala
序列：YPYDVPDYA
来源：合成
复溶：TBS (50mM Tris-HCl,pH7.4,150mM NaCl)

组分	0.2mL	1mL	25mg
HA多肽	0.2mL(5mg/ml)	1mL(5mg/ml)	25mg

保存：-20℃，至少一年有效。25mg粉末装也可以4℃保存，一年有效。


由于蛋白的每次冻融均会引起部分失活，所以溶液装或粉末装配制成溶液后须分装后于-20℃或更低温度冻存，以避免反复冻融。

• 对于粉末装，由于微量的多肽在冻干过程中沉积在管内，形成很薄或不可见的多肽层，所以在打开管盖前，建议在离心机中约8,000～12000×g离心10～30秒，使附着在管盖或管壁上的多肽聚集于管底。
  
• 对于粉末装，使用TBS进行溶液，一般用移液枪的枪头轻吹几下或者轻轻摇晃瓶子，即可使多肽完全溶解。请勿用vortex剧烈振荡，以免多肽变性而失活；溶液装可直接用于后续配制。
  
• 免疫沉淀样品的HA Peptide竞争洗脱法：本方法为非变性法，洗脱效率高，且洗脱后的样品中不含HA抗体的轻链和重链。
  
  • HA多肽洗脱液的配制：根据样品量确定洗脱液的用量，取一定量HA多肽储存液用TBS溶液进一步稀释HA多肽溶液至150μg/ml。
    
  • 每个免疫沉淀样品加入100μL HA多肽洗脱液(150μg/ml)，冰浴并摇晃孵育30分钟～2小时，为了提高洗脱效率，可延长孵育时间或重复洗脱。HA多肽洗脱液体积一般为凝胶悬液或磁珠悬液的5倍。
    
  • 4℃，6000×g离心30秒，小心转移上清至新管中，上清即为洗脱的HA融合蛋白。注意不要吸到凝胶。
• 洗脱的HA融合蛋白置于4℃待用，或者-20℃长期保存。

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